O LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA
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- Luís Osório Bernardes
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1 O LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA Instalações Sala de manipulações cores claras, iluminação natural (preferencialmente) s/ correntes de ar. Superfícies de trabalho revestidas por materiais lisos, resistentes, impermeáveis e incombustíveis. Gás e água canalizada, energia elétrica Materiais e reagentes para manipulações ao microscópio 1
2 Instalações Sala de preparação e de descontaminação - preparatório Lavatório, máquina de lavar material bancadas para preparação de material, meios de cultura, reagentes autoclaves, estufas de secagem e esterilização armários e contentores para material limpo e esterilizado Instalações material/equipamento vidraria, pinças, material para preparações microscópicas microscópio, lupa centrifuga material de limpeza e desinfeção dos locais de trabalho: álcool e anti-séticos 2
3 MATERIAL Vidraria Recipientes de contenção/medição/transferência de soluções esterilizadas ou a esterilizar em pirex e descartável caixa de Petri Tubos de ensaio Tubos de Durham (10x15 mm) Pipetas de Pasteur Pipetas graduadas; 0,1 ml; 1 ml;5 ml; 10 ml e 50ml MATERIAL Vidraria Semeadores de vidro e descartáveis Balões de fundo plano (Erlenmeyer): 100, 250, 500 e 1000ml Frascos Goblets Provetas Lâminas Lamelas 3
4 MATERIAL Instrumental; Utensílios para trabalhos de manipulação e recolha de materiais Fios e ansas com os respetivos cabos Suportes tubos Cestos de tubos e placas Recipientes para material contaminado Caixa, pinças, tesoura, bisturi, espátula, colher, facas... Zaragatoas Caixa (tubo) de pipetas Marcadores Pinças de lâminas MATERIAL Equipamento Preparatório: autoclaves (descontaminação e esterilização), estufa de esterilização, destilador, frigorífico e congelador, balança, potenciómetro Laboratório: Homogeneizador rotativo e peristáltico ( Stomacher ), agitador com magnete, centrífuga, banho-maria, estufas incubadoras, jarra anaerobiose, microscópio, vórtex, câmara de fluxo laminar, contadores de colónias, bico de Bunsen, balança 4
5 Circuito do Material Recuperação Todo o material utilizado, sujo ou contaminado suscetível de tratamento térmico: contentor Metal: autoclavagem (calor húmido); 121ºC/ 1 H Vidro: solução desinfetante c/ elevada concentração: formol, germicida Material não recuperável, nomeadamente plástico: destruição pelo calor = autoclavagem 5
6 Lavagem Geral Lavagem profunda de todo o material, eliminação de sujidade Água quente, detergente (...outros) Escovilhões, esfregão, imersão em água quente (lixívia, detergente) Água quente corrente Passagem final - água destilada Lavagem Pipetas Retirar vedante Água quente corrente Imersão em solução detergente + fervura Água quente corrente Água destilada *sujidade extrema imersão em lixívia n n Automática Manual 6
7 Secagem+Preparação Secagem Estufa - ar quente: 80ºC; 1 a 2 horas Invertido Preparação Vedar algodão cardado (tubos, balões) pipetas graduadas e de pasteur embocadura vedada Placas de Petri grupos de duas em papel kraft Utensílios: embalados individualmente, selados (cordel ou fita adesiva) Pipetas colocadas em recipientes próprios Esterilização+Armazenagem Tratamento térmico de eliminação de todas as formas de vida AUTOCLAVE=calor húmido 121ºC / 50 minutos Indicações fraca resistência ao calor seco (borracha, tampas...) 7
8 Esterilização+Armazenagem Estufa=ar seco 180ºC / 2 horas Indicações todos os que não possuam fraca resistência ao calor seco (vidro, inox...) Armazenamento: por categorias ao abrigo de poeiras e humidade Gavetas: placas de Petri, caixas com pipetas, tubos ensaio (separados por dimensão), utensílios Armários: frascos, balões, provetas, suportes 8
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